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    ELISA試劑盒的操作程序

    發(fā)布時(shí)間: 2017-09-18  點(diǎn)擊次數(shù): 1311次

    ELISA試劑盒操作程序
    1. 分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其他各步操作相同)、規(guī)范品孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上規(guī)范品孔中參加規(guī)范品50μl;在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。每孔參加酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。悄悄晃動(dòng)混勻,37℃溫育60分鐘。
    2. 測(cè)定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長(zhǎng)下丈量各孔的吸光度值(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加停止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
    3. 依據(jù)elisa試劑盒免費(fèi)代測(cè)規(guī)范品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值核算出規(guī)范曲線的直線回歸方程,再依據(jù)樣品的OD值在回歸方程上核算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度。也能夠運(yùn)用各種應(yīng)用軟件來(lái)核算。應(yīng)記住因?yàn)闃悠废♂屃说?,其?shí)踐濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。
    4. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振動(dòng)30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次,拍干。
    5. 每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震動(dòng)混勻,37℃避光顯色15分鐘.
    6. elisa試劑盒取出酶標(biāo)板,每孔加停止液50μl,停止反響(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn))。

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