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    ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)安全知識(shí)來敲門,你注意了嗎?

    發(fā)布時(shí)間: 2014-04-29  點(diǎn)擊次數(shù): 1020次

    目前ELISA法仍在研究當(dāng)中占有著主流地位,ELISA試劑盒的普遍應(yīng)用使得實(shí)驗(yàn)更加方便、經(jīng)濟(jì)和準(zhǔn)確,ELISPOT技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)也決定了它的發(fā)展?jié)摿ΑISPOT法來源于ELISA,相比較傳統(tǒng)的ELISA法有所突破,是定量ELISA技術(shù)的延伸和發(fā)展。由于游離的循環(huán)抗體或CK的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結(jié)合,傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)不能確切的反映體內(nèi)的抗體及CK的水平。80年代,國外的科研工作者根據(jù)ELISA技術(shù)的基本原理,建立了體外檢測(cè)特異性抗體分泌細(xì)胞和CK分泌細(xì)胞的固相酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISPOT)。
    ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中遇到的各種疑問:
    1,水質(zhì)原因:點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證,用娃哈哈礦泉水代替
    2,實(shí)驗(yàn)操作原因
    吸取到其它相吹干,準(zhǔn)確的取液吹干
    離心不*,延長離心時(shí)間
    樣本的污染,更換樣本
    乳化未處理*,溫?。?0℃)處理乳化現(xiàn)象
    3,儀器試劑原因
    離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具
    有機(jī)溶劑的影響,ELISA試劑盒做試劑空白看影響結(jié)果
    4,衍生化試劑原因(長時(shí)間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑
    5,與曲線好壞相關(guān),,保證曲線的正常
    ELISA試劑盒回收率
    1.空白管陽性高
    樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率
    空白管在實(shí)驗(yàn)中被污染,實(shí)驗(yàn)中防止交叉污染
    水質(zhì)原因用,娃哈哈礦泉水代替
    2.偏  高
    添加量不準(zhǔn)確,的添加量
    添加濃度不適合,添加合適的濃度
    取液吹干量多,準(zhǔn)確的取液吹干 
    取到其它相層液體,取需用相吹干
    復(fù)溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復(fù)溶液
    3.偏  低
    添加量不準(zhǔn)確,的添加量
    添加濃度不適合,添加合適的濃度
    取液吹干量少,準(zhǔn)確的取液吹干
    復(fù)溶液稀釋錯(cuò)誤或加入量多,正確的稀釋復(fù)溶液

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