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    96T人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒

    發(fā)布時(shí)間: 2012/9/11  點(diǎn)擊次數(shù): 570次
    提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大?。?/td>
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    相關(guān)產(chǎn)品:
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    人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒            

    本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:血清或血漿

    試驗(yàn)原理:
        GPI試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知GPI濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將GPI和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中GPI的濃度呈比例關(guān)系。
     
    安全性
    避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
    實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
    不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

    人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒 

    操作注意事項(xiàng)
    試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
    實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
    不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
    使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
    使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
    洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
    底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
    加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
    按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

    樣品收集、處理及保存方法
    血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
    血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
    細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
    保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒 

    操作步驟
    使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
    根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
    加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
    甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
    甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
    取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
    在450nm波長處測定各孔的OD值。

    6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。

    試劑盒性能
    1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
    2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
    3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

    人糖磷脂酰肌醇ELISA檢測試劑盒 

    結(jié) 果 判 斷 與 分 析
    1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值

    2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的GPI標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的GPI含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。

    3、檢測值范圍:0-240umol/L

    4、敏感度: 0.1 umol/L

    Histone H3,Family 3A (HISTIH3I protein) 組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 0.1ml
    Histone H3,Family 3A (HISTIH3I protein) 抗組蛋白3抗體 0.2ml
    Histone H1(Histone H1) 抗組蛋白3抗體 0.1ml
    Histone H1b/Histone H1.4(Ac-Lys53) 抗組蛋白H1抗體 0.2ml
    Histone H3-like protein 抗組蛋白H2抗體 0.2ml
    Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體 0.2ml
    Histone H3-like protein 組蛋白H3樣抗體(Brassica junceaC端抗體) 0.2ml
    HDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 抗磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體 0.2ml
    HDAC2/HD2(histone deacetylase 2) 組蛋白去乙?;?抗體 0.1ml
    HDAC2/HD2(histone deacetylase 2) 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
    HDAC3/HD3(histone deacetylase 3) 組蛋白去乙?;?抗體 0.2ml
    His tag/6His/HisX6 聚組氨酸抗體/His tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
    Mouse IgM/RBITC  羅丹明標(biāo)記小鼠IgM 0.3ml
    pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記豬IgG 0.3ml
    His tag/6His/HisX6 聚組氨酸抗體/His tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
    HisX6/6His/His tag(CT) 聚組氨酸抗體/抗His tag標(biāo)簽抗體(C端 0.1ml
    HisX6/6His/His tag(CT) 聚組氨酸抗體/抗His tag標(biāo)簽抗體(C端 0.2ml
    FLAG Tag (NT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端) 0.1ml
    FLAG Tag (NT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端) 0.2ml
    FLAG Tag(CT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(C端 0.1ml
    FLAG Tag(CT) FLAG Tag標(biāo)簽抗體(C端 0.2ml
    Mink IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記水貂IgG 0.3ml
    Rabbit IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記兔IgM 0.3ml
    Rat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記大鼠IgM 0.3ml
    rHIL-1Ra/RBITC 羅丹明標(biāo)記重組人白介素-1受體拮抗劑 0.3ml
    GST-Tag (glutathione-S-transferase) 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽蛋白抗體 0.1ml
    GST-Tag (glutathione-S-transferase) 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶標(biāo)簽蛋白抗體 0.2ml
    T7 tag(recombinant T7-tagged proteins polyclonal) polyclonal)T7 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
    T7 tag(recombinant T7-tagged proteins polyclonal) polyclonal)T8 tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
    V5 tag(recombinant V5-tagged proteins polyclonal) V5 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
    V5 tag(recombinant V5-tagged proteins polyclonal) V6 tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
    human Fibrinogen/RBITC 羅丹明標(biāo)記人纖維蛋白原 0.3ml
    KLH/RBITC 羅丹明標(biāo)記血藍(lán)蛋白 0.3ml
    OVA/RBITC 羅丹明標(biāo)記雞卵白蛋白 0.3ml
    HSA(Human Serum albumin)/RBITC 羅丹明標(biāo)記人血白蛋白 0.3ml
    KT3 tag KT3 tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
    KT3 tag KT4 tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
    VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
    VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標(biāo)簽抗體 0.2ml
    HIV gp120 艾滋病病毒抗體 0.1ml
    HIV gp120 艾滋病病毒抗體 0.2ml
    HIV gp41 艾滋病病毒抗體 0.2ml
    Rabbit anti-pig IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗豬IgG(10nm/15nm) 1ml
    Avidin/Gold 金標(biāo)記親合素(10nm/15nm) 0.1ml
    Recomb Protein G/Gold 膠體金標(biāo)記重組蛋白G(10nm/15nm) 0.5ml
    Recomb Protein G/Gold 膠體金標(biāo)記重組蛋白G(10nm/15nm) 2ml
    HIV-1 ENV (gp160) antigen/envelope 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體 0.1ml
    HI0.2ml
    Goat anti-mouse IgG/Gold 羊抗小鼠IgG—膠體金5nm 0.5ml
    Goat anti-mouse IgG/Gold 羊抗小鼠IgG—膠體金5nm 1ml
    Goat anti-Rabbit IgG/Gold 羊抗兔IgG—膠體金5nm 0.5ml
    HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗體 0.1ml
    HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-33抗體 0.2ml
    HO-2 (Heme oxygenase 2) 血紅素氧合酶-2抗體 0.1ml
    HO-2 (Heme oxygenase 2) 血紅素氧合酶-2抗體 0.2ml
    HOXc8 同源盒基因的一種 0.2ml
    HPA(heparanase) 抗乙酰肝素酶抗體 0.2ml
    Rabbit anti-Goat IgG/Gold 兔抗羊IgG—膠體金5nm 0.5ml
    Rabbit anti-Goat IgG/Gold 兔抗羊IgG—膠體金5nm 1ml
    phospho-HP1(pTyr)(phospho-heterochromatinprotein 1)(fruit fly) 抗異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體(果蠅) 0.2ml
    HOXA10 (homeobox protein A10 HOXA10抗體 0.2ml
    Phospho-HP1(pTyr43)(Phospho-heterochromati n protein 1)(fruit fly) 抗異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體(果蠅) 0.2ml
    HPV (Human papillomavirus) 人類乳頭狀瘤病毒抗體 0.2ml
     

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