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    關(guān)于進口抗體試劑常見問題分析總結(jié)

    發(fā)布時間: 2015-07-10  點擊次數(shù): 1552次

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    一、問:用于免疫接種的抗原應(yīng)如何制備呢?"

        答:抗原應(yīng)溶解在緩沖溶液。不溶性抗原和可溶性的一樣好。理想的抗原濃度是1mg/ml,然而較低濃度也可以接受的。您也可以把含有目標(biāo)蛋白的SDS-PAGE膠發(fā)給我們,將膠放于水中變脫色,因為醋酸能使得蛋白質(zhì)進一步地變性。

        對此,還要注意避免:對動物有毒的添加劑??山邮埽旱土康腟DS、咪唑、尿素、胍,非離子型去污劑,EDTA或EGTA和聚丙烯酰胺。添加的zui終的量在很大程度上取決于樣本體積/抗原濃度。

        齊老師繼續(xù)問道:“選擇哪個物種用于免疫接種?"

        使用IgG和IgY抗體針對同一抗原的優(yōu)勢:①獨立確認(rèn)預(yù)期的目標(biāo)蛋白質(zhì)被檢測。②抗體庫具有不同的特性,在不同的技術(shù)中能起到互補的作用雙重染色。③一般從遺傳角度上選擇與抗原有較遠(yuǎn)的親源關(guān)系的物種用于免疫接種。

    二、問:在兔子中生產(chǎn)的抗體比那些在雞中生產(chǎn)的更好嗎?

        答:生產(chǎn)抗體的過程是抗原,特異動物免疫反應(yīng)和測試的結(jié)合。如哺乳動物的保守靶標(biāo)蛋白,我們推薦使用在雞中生產(chǎn)的抗體。因為他們在進化上親緣關(guān)系更遠(yuǎn),進口抗體試劑且他們的免疫系統(tǒng)與保守的哺乳動物蛋白反應(yīng)更好,而這些保守哺乳動物蛋白可能不會被山羊或兔子的免疫系統(tǒng)識別。

    三、問:如何儲存抗體?

        答:血清中的抗體,對于抗體這是一個非常穩(wěn)定的存儲形式。在-20℃或-70℃的血清通常可以保存多年。在一些特殊的情況下,anti-peptide抗體儲存的時間更短。短時間可以儲存在4℃。在某些情況下操作要更加小心,*步在-20℃冷凍,之后放于-70℃冷凍的效果更好。 

        

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