在運(yùn)用ELISA試劑盒的進(jìn)程，可將已知濃度的蛋白用血清或血漿調(diào)配到試劑盒標(biāo)定的檢測限的zui高值的2倍，參加50μl做兩孔，一孔補(bǔ)入慣例的50μl規(guī)范品稀釋液，ELISA試劑盒一孔補(bǔ)入50μl樣本剖析緩沖液，即可區(qū)分出作用來，有時(shí)候，有些廠家為了到達(dá)“消除”的作用，在樣本剖析緩沖液中參加待測方針蛋白，為了鑒別出這種狀況，也可直接參加樣本剖析緩沖液做一孔，一起做比照，這樣可試出試劑盒中的針對血清血漿樣本的緩沖液是否真的有用。
如該種類型ELISA試劑盒樣本總量如為100μl的話，一般來說，會是50μl的樣本加樣量和50μl的特定的緩沖液。
1、如廠家沒有供給專門用于血清血漿樣本的緩沖液，那么只要用已知濃度的待測方針蛋白參加所測種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測方針蛋白參加PBS緩沖液中一起檢測比照，ELISA試劑盒即可知道該試劑盒是否能夠直接用來測血清血漿樣本。
2、如廠家沒有供給專門用于血清血漿樣本的緩沖液，只是有一個(gè)抽象的或一致的稀釋液，那么只要用已知濃度的待測方針蛋白參加所測種屬的血清直接加樣和用已知濃度的待測方針蛋白參加廠家供給的一致的緩沖液中一起檢測，也可得出該試劑盒是否可直接用來檢測血清血漿樣本。
3、如廠家供給專門用于血清血漿樣本的緩沖液，可用已知濃度的待測方針蛋白參加所測種屬的血清直接加樣和用緩沖液按說明書分別加樣，也可得出成果。
現(xiàn)在ELISA試劑盒檢測的樣本中，除了細(xì)胞上清外，還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。關(guān)于ELISA試劑盒客戶來說，在實(shí)驗(yàn)中可能用到不同的樣本，怎么辨別所購的ELISA試劑盒能否測手中的樣本呢？關(guān)于zui常見的細(xì)胞上清，咱們大家知道，培育細(xì)胞進(jìn)程中，無特別狀況一般是10%的牛血清參加培育基中，通過培育后，細(xì)胞的吸收耗費(fèi)，zui終細(xì)胞上清中蛋白含量會很少，并且關(guān)于一般牛血清出產(chǎn)的廠家來說，在出產(chǎn)進(jìn)程中現(xiàn)已去除了，所以對一般ELISA而言，不會影響抗體抗原的結(jié)合。